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不锈钢开口直壁容器10L（蛔虫卵测定）由上海书(shu)培实验设备有限公(gong)司提供，专(zhuan)门用于蛔虫卵测定(ding)(ding)(ding)沉淀集卵法的*耗材(cai)，其它相(xiang)关耗材(cai)包括（提供冰箱、筛网、不锈钢(gang)开口(kou)直壁(bi)容器、开口(kou)直壁(bi)量(liang)筒(tong)、螺(luo)口(kou)尖底(di)离心管、离心机、一次性巴氏滴管、漩涡混匀器、显微(wei)镜、定(ding)(ding)(ding)量(liang)计数框1ml网格和定(ding)(ding)(ding)量(liang)计数框5ml S型(xing)）。

产品介绍：

产品名(ming)称：不锈钢开口直壁容器10L（蛔虫卵测定）

规格：10L

材质(zhi)：304不锈(xiu)钢加厚

用途：蛔虫卵测定沉淀集卵法(fa)，水质检测常用耗材

相关耗材：

冰箱、离心机、显微镜、漩涡混(hun)匀器

筛网(wang)、不锈钢(gang)开口(kou)直壁(bi)容器、开口(kou)直壁(bi)量筒、

螺口(kou)尖底离心管(guan)、一次性(xing)巴氏滴管(guan)

定(ding)量计数框1ml网格和定(ding)量计数框5ml S型）

废(fei)物(wu)处(chu)理：实验的虹吸液煮沸(fei)10分(fen)钟(zhong)后可按普通废(fei)物(wu)处(chu)理，含乙酸(suan)乙酯的废(fei)液按危险废(fei)物(wu)处(chu)理。

注(zhu)意(yi)事项：实(shi)验操作人员要注(zhu)意(yi)自身防(fang)护(hu)，避免蛔虫(chong)卵的(de)污染。

蛔虫卵(luan)测(ce)定 沉淀集卵(luan)法(fa)：

蛔虫(chong)卵(luan)分受(shou)精(jing)卵(luan)和未受(shou)精(jing)卵(luan)。受(shou)精(jing)卵(luan)呈宽椭(tuo)圆形(xing)。蛔虫(chong)卵(luan)一旦进入人(ren)体(ti)，在(zai)它发育到成熟的(de)整(zheng)个(ge)过程中都会给人(ren)体(ti)造(zao)成危(wei)害。蛔虫(chong)卵(luan)在(zai)土壤、肥料、人(ren)体(ti)等自然界广(guang)泛(fan)存在(zai)！防止粪(fen)便污染环境(jing)是(shi)切断蛔虫(chong)传播途径的(de)重(zhong)要措(cuo)施。

　　蛔虫卵死(si)亡率直接影(ying)响肥料的效(xiao)果，可(ke)采(cai)用五(wu)格三池贮粪法，使粪便中虫卵大部分沉降在(zai)池底。由于(yu)粪水中游离氨的作(zuo)用和厌(yan)氧(yang)发酵(jiao)，虫卵可(ke)被杀(sha)灭，同(tong)时也会(hui)增加(jia)肥效(xiao)。在(zai)用于(yu)粪做肥料的地区，可(ke)采(cai)用泥封堆肥法，三天后(hou)，粪堆内温(wen)度可(ke)上(shang)升至(zhi)52℃或更高(gao)，可(ke)以(yi)杀(sha)死(si)蛔虫卵。

　　那么蛔虫(chong)(chong)卵(luan)(luan)死(si)亡(wang)率又是(shi)如何测定的呢(ni)？依据GB/T 19524.2—2004如下：将碱性溶液与(yu)肥料(liao)样品充分(fen)混合(he)，分(fen)离蛔虫(chong)(chong)卵(luan)(luan)，然后(hou)用(yong)密度(du)(du)较(jiao)蛔虫(chong)(chong)卵(luan)(luan)密度(du)(du)大的溶液为漂浮(fu)液，使蛔虫(chong)(chong)卵(luan)(luan)漂浮(fu)在(zai)溶液的表面(mian)，从而(er)收(shou)集检(jian)验。

　　1、蛔(hui)虫卵(luan)分离

　　称(cheng)取5.0～10.0 g样(yang)品（颗粒(li)较大(da)的(de)(de)样(yang)品应(ying)先进(jin)行研磨(mo)），放(fang)(fang)于(yu)容量为(wei)50 mL离心(xin)管(guan)中(zhong)(zhong)，注入NaOH溶(rong)液25～30 mL,另加玻璃(li)珠约10粒(li)，用橡皮塞塞紧(jin)管(guan)口，放(fang)(fang)置(zhi)在振荡器上，静置(zhi)30 min后，以200～300 r/ min频率(lv)振荡10～15 min。振荡完毕(bi)，取下离心(xin)管(guan)上的(de)(de)橡皮塞，用玻璃(li)棒将离心(xin)管(guan)中(zhong)(zhong)的(de)(de)样(yang)品充分搅匀(yun)，再次(ci)用橡皮塞塞紧(jin)管(guan)口，静置(zhi)15～30 min 后，振荡10～15 min。

　　2、离(li)心沉淀

　　从振荡(dang)器上(shang)(shang)取(qu)下离心管(guan)，拔掉(diao)橡(xiang)(xiang)皮塞，用滴管(guan)吸取(qu)蒸(zheng)馏(liu)水，将附着于(yu)橡(xiang)(xiang)皮塞上(shang)(shang)和管(guan)口内(nei)壁(bi)的样品(pin)冲入管(guan)中(zhong)，以(yi)2000～2500 r/ min速度离心3～5 min后(hou)，弃去上(shang)(shang)清液。然(ran)后(hou)加(jia)适(shi)量(liang)蒸(zheng)馏(liu)水，并用玻璃(li)棒将沉淀(dian)物(wu)搅起(qi)，按上(shang)(shang)述方法重复(fu)洗涤三(san)次。

　　3、 离心漂(piao)浮

　　往离(li)心(xin)(xin)管中加(jia)入少量饱和(he) NaNO3 溶(rong)液(ye)，用(yong)玻璃(li)棒将沉(chen)淀物搅成(cheng)糊状后(hou)，再(zai)徐(xu)徐(xu)添(tian)加(jia)饱和(he) NaNO3 溶(rong)液(ye)，随(sui)加(jia)随(sui)搅，直(zhi)加(jia)到离(li)管口约1 cm为止，用(yong)饱和(he) NaNO3 溶(rong)液(ye)冲洗玻璃(li)棒，洗液(ye)并(bing)入离(li)心(xin)(xin)管中，以2000～2500 r/ min速度离(li)心(xin)(xin)3～5 min。

　　用金属(shu)丝(si)圈不(bu)断(duan)将离(li)心管表层液(ye)膜移于盛有半杯蒸(zheng)馏(liu)水(shui)的烧(shao)杯中，约30次(ci)后，适当增加一些饱(bao)和NaNO3 溶(rong)液(ye)于离(li)心管中，再次(ci)搅(jiao)拌、离(li)心及移置液(ye)膜，如此反复操(cao)作３～４次(ci)，直到液(ye)膜涂(tu)片观(guan)察不(bu)到蛔(hui)虫卵为(wei)止。

　　4、抽滤镜检

　　将烧杯中混合(he)悬液(ye)，通过(guo)覆以微孔火棉胶(jiao)滤膜的(de)高尔特曼氏漏斗抽(chou)滤。若混合(he)悬液(ye)的(de)浑浊度(du)大，可更(geng)换滤膜。

　　抽滤(lv)完毕，用弯头镊子将(jiang)滤(lv)膜(mo)从(cong)漏斗的滤(lv)台上(shang)小心(xin)取下(xia)(xia)，置于载玻片(pian)上(shang)，滴(di)加二、三滴(di)甘油溶液，于低倍显微镜下(xia)(xia)对整张滤(lv)膜(mo)进(jin)行观察(cha)和(he)蛔虫(chong)卵(luan)计数。当(dang)观察(cha)有蛔虫(chong)卵(luan)时，将(jiang)含有蛔虫(chong)卵(luan)的滤(lv)膜(mo)进(jin)行培养(yang)。

　　5 、培养

　　在(zai)培养皿的底部平铺(pu)一层厚约(yue)1 cm 的脱(tuo)(tuo)脂(zhi)(zhi)棉(mian)，脱(tuo)(tuo)脂(zhi)(zhi)棉(mian)上铺(pu)一张直(zhi)径与培养皿相适(shi)的普通滤纸。为防止霉菌和原生(sheng)动(dong)物(wu)的繁殖，可加入甲(jia)醛(quan)溶(rong)液或(huo)甲(jia)醛(quan)生(sheng)理盐水，以浸透滤纸和脱(tuo)(tuo)脂(zhi)(zhi)棉(mian)为宜。

　　将含蛔虫卵的滤膜(mo)平(ping)铺在滤纸(zhi)上，培养皿加盖后置于恒温培养箱(xiang)中，在28 ℃～30 ℃ 条件(jian)下培养，培养过程中经(jing)常滴加蒸馏(liu)水(shui)或(huo)甲醛溶液，使滤膜(mo)保(bao)持潮(chao)湿(shi)状态。

　　6、 镜检

　　培养10～15 d ，自培养皿中取出滤(lv)膜置于载玻片(pian)(pian)上(shang)(shang)(shang)，滴(di)加甘油溶液，使其透明后(hou)，在(zai)(zai)低(di)倍镜(jing)下(xia)查找蛔(hui)虫卵，然后(hou)在(zai)(zai)高倍镜(jing)下(xia)根据(ju)形态，鉴定(ding)卵的死活，并加以计数。镜(jing)检(jian)时若感(gan)觉视野的亮度(du)和膜的透明度(du)不够，可在(zai)(zai)载玻片(pian)(pian)上(shang)(shang)(shang)滴(di)一滴(di)蒸馏水，用盖玻片(pian)(pian)从滤(lv)膜上(shang)(shang)(shang)刮下(xia)少(shao)许含(han)卵滤(lv)渣，与(yu)水混合均匀，盖上(shang)(shang)(shang)盖玻片(pian)(pian)进行镜(jing)检(jian)。

　　7、 判定

　　凡含有幼虫的(de)，都(dou)认为是活(huo)卵(luan)，未孵化或单细胞的(de)都(dou)判为死卵(luan)。

　　8、 结(jie)果计算

　　式中：

　　K —蛔虫卵死亡率（%）

　　N1—镜检总卵数

　　N2—培(pei)养后镜检活卵数